葡萄糖旋光度测定加入氨(加入氨的葡萄糖旋光度测定方法)

葡萄糖是一种重要的生物分子,它参与了机体内多种生理过程。测定葡萄糖的含量是很多实验的基础,而葡萄糖的旋光度测定就是其中的一种方法。葡萄糖有旋光性,正常情况下,它的旋光度是[d] +52.5°,若葡萄糖分子中存在苯环易位异构体,则会引起旋光度的改变。加入氨对葡萄糖旋光度的改变也是一种测定葡萄糖含量的方法。

实验步骤

1. 准备样品

将待测样品葡萄糖溶解于0.1mol/L的氢氧化钠溶液中,稀释后使其旋光度约在+10°左右。将加入氨的溶液用相同的氢氧化钠稀释。

2. 过滤

将待测样品和加入氨的溶液分别用滤器过滤,避免因溶液中的杂质影响测定结果。

如果您正在使用的仪器是自动分析的,则此步骤可以跳过。

3. 旋光度测定

用测量值小的旋光度仪(如Perkin Elmer 241或JascoJ-810)、0.2cm石英池,在546nm波长下测定旋光度。如果您使用的是手动旋光仪,则每次测定前应该先将仪器校准至0°。

4. 加入氨

将0.1mol/L氨溶液用加样枪加入0.15ml,至0.4ml(管底到标记线),并快速搅拌。

5. 旋光度测定

在加入氨后,立即测定旋光度。

实验注意事项

1. 不能用盐酸代替氨,否则会引起葡萄糖分子的裂解,影响测定结果。

2. 氨只能在待测的葡萄糖旋光度与玻璃的旋光度相等或接近的情况下使用。如果待测的葡萄糖旋光度过大,则不应该使用此方法。

3. 加入氨时应该快速而均匀地加入,避免葡萄糖与氨的反应失去动力学特性。

4. 手动旋光仪应该每次测定前都要校准至0°,避免误差。

葡萄糖旋光度测定加入氨(加入氨的葡萄糖旋光度测定方法)

总之,葡萄糖旋光度测定加入氨是一种简单、快速、灵敏的测定葡萄糖含量的方法。其原理是利用氨与葡萄糖分子之间的作用,改变葡萄糖的空间构象,从而引起旋光度的变化。需要注意的是,在使用此方法时需要遵循实验步骤和注意事项,才能保证测定的准确性和可靠性。


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